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实验案例
全自动样品快速研磨仪对水稻叶片研磨实验前后效果及操作方法|上海净信
摘要: 全自动样品快速研磨仪对水稻研磨叶片研磨实验主要目的是满足分子标记辅助育种中基因型鉴定 、基因克隆 、测序的需要,本研究借用棉签等具吸附功能的材料代替移液器,依次直接在2种DNA提取液中操作,建立了一种简单 、快速 、环保的水稻叶片DNA提取方法.结果表明,提取溶液通过PCR扩增,满足基因扩增对模板的要求。
同时,对其进行了灵敏度测试,稀释107倍仍然能够扩增出目标片段;最后通过PCR、克隆载体连接等分子生物学手段,验证此方法也满足测序的需要.本方法能够在90s内完成植物叶片DNA的提取,解决了目前植物基因组DNA提取方法需要离心机等昂贵特殊设备(bei) 、提取步(bu)骤繁锁 、提取过程中(zhong)刺激(ji)味大 、提取时间长等问(wen)题,有利于(yu)大规模(mo)开展分子标记辅助育(yu)种中(zhong)材料基因型的鉴(jian)定,具有简单(dan) 、快速(su) 、廉价 、环保等优(you)点。
实验目的:拟(ni)测(ce)试(shi)全自(zi)动样品快速研(yan)磨(mo)仪对水稻(dao)叶片研(yan)磨(mo)效果
1.测试对象:上海净信研磨仪,型号为JXFSTPRP-24L
2.工作原理:样品(水稻叶片(pian))放(fang)入离心管中,放(fang)入研磨球,通过(guo)研磨仪的高速上(shang)下振荡带动(dong)研磨珠进行粉(fen)碎样品。
3.实验器材:上海净信组织研磨仪主机,水稻叶片,不锈钢(gang)研磨珠两颗,提取(qu)试剂
实验步骤:
一、首先根据研(yan)(yan)磨(mo)(mo)要求将组织研(yan)(yan)磨(mo)(mo)仪的研(yan)(yan)磨(mo)(mo)频率及研(yan)(yan)磨(mo)(mo)时间进行设(she)置
二(er)、把水稻(dao)叶片剪成小段(duan)放(fang)入净信离(li)心管(guan)中(zhong),加(jia)入氧(yang)化(hua)锆珠和相应提取试剂
三、最后把离心管放入机器适配器中,启(qi)动设备进行研磨,完成样品粉碎(sui)
实验效果:
研磨前后效果图
注:全(quan)自动样品快速(su)研磨(mo)仪针对叶片(pian)的研磨(mo)时,尽可(ke)能加提取试剂(ji),让研磨(mo)过程中有(you)液体的情况下(xia)使研磨(mo)效果会更加充分。