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凈信多樣品組織研磨儀研磨破碎黃芪實驗
本研究從富含多(duo)糖和次生物質的黃(huang)芪(qi)干燥根提取高質量的基(ji)因組(zu)DNA,為今后黃(huang)芪(qi)遺傳多(duo)樣性、分子鑒定研究奠(dian)定基(ji)礎。
實驗步驟:
- 1.把準備好的黃芪樣品剪切成小塊,
- 2.將樣本放入50ml鋼罐中,放入凈信研磨儀上
- 3.設置參數研磨頻率55HZ,時間25 s就可研磨成粉狀,
- 4.從凈信研磨儀上取出樣本,溶解后做后續實驗。
實驗結果
采用(yong)改良的(de)(de)CTAB法(fa)(fa)、高(gao)鹽(yan)低pH法(fa)(fa)、SDS法(fa)(fa)、苯(ben)酚(fen)法(fa)(fa)等9種提(ti)取(qu)液提(ti)取(qu)黃芪(qi)干(gan)燥根的(de)(de)基(ji)因(yin)(yin)組 DNA,結果表明,CTAB法(fa)(fa)和(he)高(gao)鹽(yan)低pH法(fa)(fa)能獲得高(gao)質量(liang)的(de)(de)基(ji)因(yin)(yin)組DNA。用(yong)這(zhe)兩種方法(fa)(fa)提(ti)取(qu)9批黃芪(qi)干(gan)燥根,A260/A280值均在(zai)1.8~2.0之 間(jian),瓊脂糖凝膠電泳條(tiao)帶清(qing)晰(xi),降(jiang)解較少(shao),能有效(xiao)的(de)(de)從(cong)黃芪(qi)干(gan)藥材中提(ti)取(qu)到高(gao)質量(liang)的(de)(de)基(ji)因(yin)(yin)組DNA。將DNA以引物5S進行(xing)PCR擴(kuo)增,獲得清(qing)晰(xi)的(de)(de)條(tiao)帶。